全自动梯度PCR仪可以自动完成PCR反应的各个步骤，包括样品加载、温度控制、扩增循环等，大大简化了PCR实验操作的复杂度和时间，通过精确控制温度，使引物与模板结合、变性、退火和扩增等PCR反应的各个步骤得以高效进行。温度梯度功能允许在不同温度下进行多个PCR反应，以寻找扩增条件。
 

　　全自动梯度PCR仪的工作原理如下：
 

　　1.将待测样本加入PCR反应管(通常是一个细小的玻璃管)，然后将其放置在设备的样品盒中。
 

　　2.在整个实验开始之前，根据所需放大的目标DNA片段的序列信息，需要选择合适的引物。在引物与模板DNA的结合过程中，温度被加热至引物与模板结合的温度。
 

　　3.在PCR扩增过程中，温度是一个关键因素。梯度PCR仪有能力在不同的温度区间中进行多个PCR反应，以帮助确定温度范围。因此，在实验开始之前，用户可以设置反应的温度梯度，以使每个PCR反应管在反应过程中经历不同的温度。这有助于确定适合目标DNA片段扩增的最佳温度。
 

　　4.在PCR反应的初始阶段，反应温度被提高至变性温度，通常为94-98°C。在此温度下，DNA模板的双链被解开，形成两条单链DNA。
 

　　5.在第二阶段，温度被降低至引物与模板结合的温度。在此温度下，引物会与目标DNA片段的模板互补配对。
 

　　6.在第三阶段，温度被升高至延伸温度，通常为72°C。在此温度下，DNA聚合酶与引物中的基因组进行互补，并合成新的DNA链。
 

　　7.实时监测：还配备了光学传感器，可以实时监测PCR反应过程中DNA扩增的程度。通过监测PCR反应瓶中的荧光信号强度的变化，可以定量地评估DNA扩增的效果。
 

　　全自动梯度PCR仪的使用方法：
 

　　1.准备PCR反应液：根据实验设计，按照适当的比例将模板DNA、引物、dNTPs和聚合酶等反应物混合在一起。
 

　　2.将反应液分装至PCR管或片上PCR孔中。
 

　　3.将PCR管或PCR片放置在样品位中。
 

　　4.设置PCR反应参数：根据实验需要，设定PCR仪的温度程序、扩增循环次数等参数。
 

　　5.点击启动按钮，开始PCR反应。
 

　　6.根据需要，可以监测PCR反应的进度和结果。