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PCR實操避坑分享發(fā)布時間：2025-09-28

前段時間和大家分享了PCR反應的過程控制，今天來聊聊PCR的操作手法。實操可以說是整個PCR實驗流程中最容易被忽略卻又至關重要的一環(huán)。下面小編就來分享一下自己當初的一些經驗心得，僅代表個人看法。先說體系配置（各組分分開，非預混液）。配置前先計算好所需要的各組分體積，統(tǒng)一配置好后再...

詳情

2022
1-11

熒光定量PCR的理論依據是什么？
熒光定量PCR在反應中，引入了一種熒光化學物質，隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化。從而得到一條熒光擴增曲線。熒光擴增曲線...
2022
1-4

二維梯度PCR的應用領域有哪些？
PCR技術從發(fā)明至今已有二十多年的時間，用于PCR實驗的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過程沒有太大變化，包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應條件、使用試劑的量甚至是引物等，很多研究者在進行PCR優(yōu)化時都會考慮退火溫度的優(yōu)化，這時...
2021
12-27

實時熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護方法
高分辨率溶解（HRM）作為一種聯(lián)管式的PCR后分析技術，引起了學術界的廣泛關注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對PCR產物進行分析，與傳統(tǒng)的溶解曲線分析類似，但提高更多的信息，因而具有更廣泛的應用?？筛鶕CR產物的序列、長度、GC含量或鏈...
2021
12-18

雙槽二維梯度PCR儀該如何設置合適的退火溫度？
雙槽二維梯度PCR儀就是將多個的PCR反應放在一起做，不用一次一次的作很多次，溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度，或者說可以在適合的退火溫度下擴增出目的條帶。除具標準PCR儀功能外，其梯度模塊還能同時進行多達12個不同退火溫度的PC...
2021
12-8

手動移液器使用期間注意事項
手動移液器是一種長期使用的工具，廣泛用于各種實驗室。由于每天都要使用數(shù)小時，在選擇時人體工程學和個人偏好（例如握持舒適性）是非常重要的標準。在尋找適合工作的移液器時，還需要考慮其它因素，如應用、實驗室工作流程、所需的量程范圍、樣品的物理特性...
2021
12-1

細胞凍存盒的實驗步驟，您都知道嗎？
什么是細胞凍存？細胞長勢良好，供大于求時，就可以考慮把細胞凍存起來，以后再用。當溫度低于-70℃時，細胞內的酶活性全部停止，代謝活動停止，故可以達到長期保存的目的。隨著溫度降低，細胞內外的水分都會結晶，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞...

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