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PCR實(shí)操避坑分享
發(fā)布時間:2025-09-28
前段時間和大家分享了PCR反應(yīng)的過程控制,今天來聊聊PCR的操作手法。實(shí)操可以說是整個PCR實(shí)驗(yàn)流程中最容易被忽略卻又至關(guān)重要的一環(huán)。下面小編就來分享一下自己當(dāng)初的一些經(jīng)驗(yàn)心得,僅代表個人看法。先說體系配置(各組分分開,非預(yù)混液)。配置前先計(jì)算好所需要的各組分體積,統(tǒng)一配置好后再...
詳情
2025
3-25
你知道該如何使用二維梯度PCR嗎?
二維梯度PCR基于不同溫度下引物結(jié)合能力的變化,通過將引物濃度、溫度逐漸升高或降低,使反應(yīng)中優(yōu)化溫度梯度,以達(dá)到PCR反應(yīng)體系在適宜的溫度條件下進(jìn)行特異性擴(kuò)增的過程,在分子生物學(xué)和遺傳學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用,包括基因檢測和測序、醫(yī)學(xué)診斷、環(huán)境...
2025
3-20
超微量分光光度計(jì)的實(shí)驗(yàn)過程
超微量分光光度計(jì)是一種用于測量微量物質(zhì)光學(xué)特性的儀器,可快速準(zhǔn)確的檢測核酸、蛋白質(zhì)和細(xì)胞溶液,同時配備比色皿模式,進(jìn)行細(xì)菌等培養(yǎng)液濃度的檢測核酸檢測每次測量所需要的樣品量僅需0.5至2ul。可直接將樣品點(diǎn)于加樣臺上,無需比色杯或毛細(xì)管等附件...
2025
3-18
二維梯度PCR的作用有哪些?
二維梯度PCR(GradientPCR)是一種PCR的改良技術(shù),它采用兩種溫度梯度對PCR反應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化,能夠提高PCR反應(yīng)的特異性和產(chǎn)物純度。在一個溫度梯度的條件下進(jìn)行PCR反應(yīng)。它基于不同溫度下引物結(jié)合能力的變化,通過將引物濃度、溫度逐漸...
2025
3-12
【柏恒科技小課堂】PCR反應(yīng)體系體積使用10、20 、30.... 50uL?
在PCR實(shí)驗(yàn)中,反應(yīng)體系體積的選擇是一個經(jīng)常被忽略的關(guān)鍵參數(shù),它直接影響到PCR反應(yīng)的效率和結(jié)果。10、20、25、50uL是常用的PCR反應(yīng)體系體積,每種體積都有其適用的場景和優(yōu)缺點(diǎn)。以下是對這幾種體積選擇的詳細(xì)分析,希望能幫助大家根據(jù)具...
2025
3-11
如何正確的使用全自動梯度PCR儀?
全自動梯度PCR儀在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)等多個領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用,為科研工作者和臨床醫(yī)生提供了高效、精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)和檢測服務(wù)。全自動梯度PCR儀的測定步驟:-閱讀說明書:在使用前,仔細(xì)閱讀梯度PCR儀的使用說明書,了解其功能、操作方法和注...
2025
2-25
實(shí)時熒光定量PCR儀準(zhǔn)確性高、測量速度快
實(shí)時熒光定量PCR(qPCR)是在普通PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程。在PCR反應(yīng)早期,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期、線性期和平臺期,可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn)上...
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